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DAPI染色液

货号:DF014

应用:病理组织细胞和细胞核染色

产品描述

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍,DAPI和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

储存条件:2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:六个月。

注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● DAPI有毒,避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ● 甲醇● 移液器及吸头●荧光显微镜

使用方法:

1、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。

2、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。

3、室温放置3-5分钟。

4、吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。

5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

注意事项:

1、本DAPI染色液的浓度经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。

2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4、DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

保存条件:-20℃避光保存,一年有效。